ATP 熒光檢測原理 --生物熒光

    ATP（Adenosine Triphosphate，三磷酸腺苷）是各種生命活動能量的直接來源，存在于所有活的動植物細胞、細菌和食物殘渣中。ATP 熒光檢測法是根據(jù)螢火蟲發(fā)光原理開發(fā)的快速檢測技術。即有氧條件下，蟲熒光素酶催化蟲熒光素和 ATP 之間發(fā)生氧化反應形成氧化熒光素并發(fā)出熒光，其強度與微生物數(shù)量呈比例關系。

ATP熒光檢測儀原理及應用

圖：所有生物細胞均含有ATP

熒光檢測作用機理如下：

    ATP快速檢測衛(wèi)生監(jiān)控系統(tǒng)（以下統(tǒng)稱為 ATP 熒光檢測儀）即是通過檢測熒光信號的強度從而得知待測目標被細菌、食物殘渣等污染的程度，因此 ATP 的檢測可以作為判斷是否潔凈的指標。

與其它評估方法相比，ATP 快速監(jiān)控具有以下明顯優(yōu)勢：

1）． 實時監(jiān)控：熒光素酶/熒光素/ATP 反應為即時反應，讀數(shù)可以在數(shù)秒之內得到。因此可根據(jù)結果立即采取糾正措施。

2）． 良好的可靠性和一致性：ATP 熒光檢測儀可以確定出各種有機物和/ 或微生物殘渣的存在。另外由于它使用獨有的液體穩(wěn)定試劑，因而檢測結果準確、重復性好，為真實的潔凈程序評估提供了可靠依據(jù)。

3）． 直接和間接危險性評估：ATP 檢測的是表面已有的生物物質和有生物 殘留物、易滋生微生物的潛在危險區(qū)域。食物殘留區(qū)域是最易受到微生物污染或 最易發(fā)生交叉污染的地方。

4）． 使用簡便：非專業(yè)技術人員也可輕松使用 ATP 熒光檢測儀、拭子和軟件，這使得日常使用趨于簡單化。

5）． 結果易于判讀：標本檢測結果以相對發(fā)光單位（RLU）來顯示，它代表了污染物產(chǎn)生的光總量。檢測結果可以直接與通過(Pass)/不通過(Fail)數(shù)值進行 比較，通過則屏幕上顯示為對號（√）；略微超出期望值的則顯示警告符號（?。?， 即介于通過和不通過之間的數(shù)值；結果超出最高限量值則顯示叉號（×）。RLU讀數(shù)越小表示表面越潔凈。

ATP 熒光檢測儀應用進展

    ATP 生物發(fā)光技術產(chǎn)生于20 世紀70年代中期。1983 年，Moyer等最早 提出細胞內源性ATP的含量可以反映細胞的活性和活細胞的數(shù)量。同年 Gronroos等也證實該技術是一種可靠、靈敏度高的確定細胞活性度的檢測方法。20 世紀 80 年代，英國人首先研制出ATP檢測儀檢測系統(tǒng)，隨后發(fā)展到歐洲、 美國和日本。應用范圍涉及食品加工、超市和飲食行業(yè)，檢測內容包括微生物和 食品殘渣。1998 年，日本國會頒布了《關于食品制造過程管理高度化臨時措施法》，其中即包含了應用 ATP 檢測儀檢測系統(tǒng)的內容。1999 年，日本還成立了 ATP 涂抹檢查研究會，專門研究該方法的使用效率和應用領域，其內容之一就是在食品衛(wèi)生監(jiān)測領域中，解決現(xiàn)場微生物的檢測問題。20 世紀末，一些 ATP檢測儀檢測系統(tǒng)及技術被引進我國，到目前為止，除個別省級衛(wèi)生監(jiān)督檢測單位裝備外，主要是在一些外資或合資企業(yè)中自行檢測使用。2002 年，我國衛(wèi)生部頒發(fā)了食品加工企業(yè) HACCP 實施指南，鼓勵食品加工企業(yè)引入ATP檢測系統(tǒng)。 近年來，蟲熒光素酶已通過基因工程生產(chǎn)，價格大幅度降低，而且 ATP 生物發(fā) 光法在檢測食品微生物時簡單、快速且靈敏度高， 隨著相關儀器的小型化，ATP 生物發(fā)光技術必將會在國內相關行業(yè)得到迅速普及。

2.ATP熒光檢測儀的應用

ATP熒光檢測儀通過生物發(fā)光原理對液態(tài)樣本中的菌落總數(shù)進行檢測，其中芯片的設計可以同時滿足6個樣本的檢測，試劑用量少，效率高，可以應用在食品安全和環(huán)境領域。

圖2.ATP熒光檢測儀在零售業(yè)餐飲衛(wèi)生和人員衛(wèi)生方面應用場景

ATP的主要來源

①微生物：細菌、酵母&霉菌；

②食品：水果、乳制品、蔬菜、肉類等；

③人員。

ATP的主要來源

ATP與微生物關系

ATP與食物和微生物的關系

ATP熒光檢測儀的特點

    ATP熒光檢測儀具有快速、準確、靈敏、簡便、可靠等優(yōu)點，能迅速的獲得檢測結果。

ATP熒光檢測儀的優(yōu)點及特點